反转录PCR (reverse transcription PCR,RT-PCR),是指在反转录酶作用下,以mRNA为模板合成的cDNA 第一链为模板的PCR。该反应分为两步,第一步在单引物的介导和反转录酶的催化下合成RNA 的互补链cDNA; 第二步加热后cDNA 与RNA 链解离,然后与另一引物退火,并由DNA 聚合酶催化引物延伸生成双链DNA,最后同常规PCR一样,扩增靶DNA。合成cDNA 第一链所用的反转录酶是一类依赖于RNA 的DNA 聚合酶。
RT-PCR在临床诊断中的应用领域,包括RNA病毒载量的评估和基因转录产物的分析,发挥着重要的作用。
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