在免疫疫苗研究中的应用

随着免疫学的不断发展，人类在免疫制剂研究方面，取得了不少成就。实际生产中应用最广泛的是灭活疫苗和减毒活疫苗，但两者在生产实际中均存在着有的免疫效果不确实、非特异性反应强、保护期短等缺点^[4]。抗独特型抗体作为抗原的模拟物，可代替病原体，诱导机体产生抗病原体的特异性免疫应^[5]，即所谓抗独特型疫苗，可以作为新一代免疫疫苗，用以弥补现有疫苗的不足。迄今为止，抗独特型疫苗主要应用于肿瘤免疫方面。抗独特型抗体疫苗基于免疫网络学说，抗原可刺激机体产生Ab1，Ab1上的独特型又可刺激机体产生一系列的Ab2，Ab2中能有效模拟外源抗原的Ab2β，可结合Ab1的互补位，引起特异性的、与正常抗原相似的免疫应答，Ab2又可诱导产生Ab3武汉百度推广，从而构成对原始抗原反应的复杂网络。应用抗独特型抗体疫苗激活抗肿瘤免疫是治疗肿瘤的有效途径之一。目前，抗独特型疫苗主要有Ab1、Ab2、单链抗体(single—chainfragmentvariable，scFv)疫苗、微抗体四种。

（1）Ab1疫苗：该疫苗可诱导独特型网络次联反应，具有以下特点（1）容易获得大量免疫原，比较安全；（2）能打破机体对肿瘤抗原的免疫耐受；（3）相对于Ab2疫苗，直接使用Ab1疫苗比较经济；（4）Abl可诱导产生多克隆的Ab2，多克隆Ab2可诱导较强的Ab3反应；（5）Abl疫苗可间接激活一系列宿主免疫效应功能以摧毁肿瘤细胞，这些效应机制包括抗体依赖性细胞毒性(AD—CC)和补体介导的细胞毒性(CDC)。

（2）Ab2疫苗：1981年，Nisonoff等提出了Ab2可作为抗传染病疫苗的构想。具有抗原“内映象”的Ab2可作为替代抗原制备疫苗。Ab2具有以下特点：（1）不含传染性病原体，可避免死疫苗或减毒活疫苗中残留的活病原体或毒力返强；（2）可利用单克隆抗体技术，解决某些病原体或抗原来源不足问题；（3）可避免基因工程技术或合成肽技术制备抗原发生的构型缺陷问题；（4）能刺激处于静止阶段的T、B细胞进行反应，在预防新生期的某些感染特别有意义；（5）能刺激细胞介导的免疫，这在病毒感染中十分重要；（6）还可模拟不能用重组技术或多肽合成技术制备的许多细菌和寄生虫的碳水化合物或脂类保护性抗原。目前多个系列的抗独特型抗体用于模拟不同的人肿瘤相关抗原已经制备成功，并得到验证能在鼠、兔及猴体内引起特异性抗肿瘤免疫应答^[6]。

（3）单链抗体(scFv)疫苗：由于单克隆抗体分子较大，免疫原性较弱，组织穿透力弱，且多为鼠源性，易引发人免疫系统产生人抗鼠抗体(HAMA)反应，无法反复使用，因此抗体分子小型化和人源化是单克隆抗体治疗的发展方向。目前国外已开始研究噬菌体抗体技术、嵌合抗体技术、基因工程抗体技术以解决人源化抗体问题。而国内目前报道的人源化方法主要有嵌合、表面重塑(resurfacing)、重构(reshaping)以及链替换(chain shuffling)^[7]。然而，目前较多应用的是scFv，单链抗体是抗体重链和轻链的可变区(V和V)通过连接肽(约l5-25个氨基酸)连接而成的重组蛋白，它是抗体与抗原结合的最小单位，其分子大小仅为完整抗体的1/6。近年来，随着对单链可变区抗体研究的不断深入，以单链可变区抗体形式的抗独特型疫苗(scFv)的研究成果已应用于预防和治疗多种疾病。在抗链球菌的研究中，AidScFv被认为是一种新的重要的免疫原，不需要添加任何佐剂，产生的抗体量大于抗原基因疫苗产生的抗体量^[8]。

（4）微抗体疫苗：目前，Ab1、Ab2和scFv用作肿瘤疫苗已经取得了很大进展，但用于临床仍存在一些问题。比如：应用的Ab1和Ab2多为鼠源性，反复应用容易引起人抗鼠抗体反应；scFv的应用又存在稳定性不够，亲和力大多下降（由于缺乏Fc段），半衰期短，很快从血液中被清除掉，从而影响到达肿瘤部位的抗体浓度等等缺陷。研究人员将scFv与带有铰链区(hinge)的人免疫球蛋白重链恒定区CH3融合，构建并表达了微抗体，微抗体是中等分子量大小的蛋白，在体内的代谢较慢，可以有效地到达肿瘤部位，并起到诱发免疫反应和杀伤肿瘤的目的。由于微抗体特殊的分子结构，增加了抗原的表面积，并改变了抗原的活性基因构型，从而增强了它的免疫原性，所以在其用作疫苗时可不需佐剂^[9]。